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Health

上海伯杰医疗科技股份有限公司

8月 第一期

目录

C O N T E N T S

免疫学知识

公司员工生活简要

现公司研究项目与进度

娱乐、休闲

免疫学知识

原理：

免疫层析法(immunochromatography)是

近几年来国外兴起的一种快速诊断技术，其

原理是将特异的抗体先固定于硝酸纤维素膜

的某一区带，当该干燥的硝酸纤维素一端浸

入样品（尿液或血清）后，由于毛细管作用，

样品将沿着该膜向前移动，当移动至固定有

抗体的区域时，样品中相应的抗原即与该抗

体发生特异性结合，若用免疫胶体金或免疫

酶染色可使该区域显示一定的颜色，从而实

现特异性的免疫诊断。

免疫层析技术是建立在层析技术和抗原一抗

体特异性免疫反应基础上的一项新兴免疫检

测技术。

免疫层析技术

免疫层析技术以固定有检测线和控制线的条状纤维

层析材料为固定相，测试液为流动相，通过毛细管

作用使待测物在层析条上移动。

待测物在T线处发生特异性免疫反应。游离物在C线

处发生免疫反应。

应用：

免疫层析检测技术可以应用于各种传染

病、早期癌症、性病、艾滋病、早早孕、

排卵、胎儿畸形早期检测等许多临床检

测项目。在对临床测定的样品要求、检

测时间、仪器设备、人员要求、测试费

用、安全性等诸多方面具有一般常规方

法所不可比拟的优点。

免疫层析技术的应用

1：用候选抗体检测赋值样本时灵敏度低。

解决方法:⑴ 此项目临床上测定区间多少，如果灵敏度较高可以考虑稀释一定倍数再测定。

⑵线性上不去很有可能是标记抗体和包被抗体的用量不合适，理论上用量不足，但实际应用时并不一定，

建议对标记抗体和包被抗体设置梯度进行调试。

⑶换用小粒径的标记物，小粒径的标记物比表面积大，结合的抗体量更多。

⑷ 抗体亲和性不佳，更换原料。

2：用候选抗体检测样本时高值样本线性上不去。

解决方法:⑴此项目临床上测定区间多少，如果灵敏度较高可以考虑稀释一定倍数再测定。

⑵线性上不去很有可能是标记抗体和包被抗体的用量不合适，理论上用量不足，但实际应用时并不一定，

建议对标记抗体和包被抗体设置梯度进行调试。

⑶换用小粒径的标记物，小粒径的标记物比表面积大，结合的抗体量更多。

⑷ 抗体亲和性不佳，更换原料。

免疫层析技术面临的问题与解决方法

免疫层析技术面临的问题与解决方法

3：用候选抗体检测已赋值的临床样本，相关性指标较差。

解决方法：

⑴样本来源及赋值数据是否可靠？样本是否新鲜？有条件的话可以用对照试剂盒对样本进行检测，以确

定样本的实际数值是否发生改变。

⑵ 样本中存在干扰成分，需筛选合适的阻断剂。

⑶ 试剂本身重复性较差，需重新优化工艺。

4：标记好的抗体，封闭完了放在储存液里，一两天后有沉淀。

解决方法：

胶体金或是荧光微球标记后的抗体时间久了出现轻微沉淀很正常，涡旋或是水浴超声沉淀即可消失。如

果出现结块沉淀，超声后仍无法去除，则可能存在以下问题：

⑴ 标记体系中PH值不合适，导致在标记时就出现聚沉现象，设置PH梯度或更换缓冲体系进行调试。

⑵ 封闭剂的成分或是用量不合适，导致金颗粒或是微球表面有裸露位点，在储存时出现交联聚集；调

整封闭剂用量或更换封闭剂（厂家、种类）再测试。

⑶储存液不合适，导致偶联的复合物不稳定，出现解离，需重新配制储存液。

免疫层析技术面临的问题与解决方法

5：为了提升试纸条检测灵敏度，T线提升了包被用量，但是信号并没有增加。

解决方法：

NC膜是空间立体结构，结合蛋白的数量是有限的，超过上限后多余的蛋白没有结合或结

合的蛋白不牢固，甚至会造成蛋白的堆积，形成空间位阻效应，致使检测时信号不再增

加甚至降低。在调整工艺时，需要根据测试结果选择合适的包被用量。

6：阴性组用样本稀释液进行测试，T线出现假阳性的原因。

解决方法：

这种假阳是由于标记物和包被的蛋白非特异性结合造成的，项目中很常见，可从以下几

个方面解决：

⑴ 在标记时更换封闭剂成分或是增加用量。

⑵ 在不影响试剂灵敏度的情况下，降低标记和包被抗体的用量，或在样品垫中添加封闭

剂进行流动封闭，将整体信号压下来，来消除这种本底信号。

⑶ 增加离子浓度或更换稀释液，改用其他体系进行尝试。

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